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today521328新蟲 (初入文壇)
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[求助]
目的基因的連接與轉(zhuǎn)化
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| 求助：目的基因與質(zhì)粒連接后4℃冰箱可以放多久，我已經(jīng)放了一天多了，感受態(tài)細(xì)胞還沒到，想問下連接體系是不是會有問題。還有 轉(zhuǎn)化后的感受態(tài)放4℃能放多久啊！轉(zhuǎn)化后在4℃放兩三天應(yīng)該可以用吧！謝謝 |
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drxiao2005
金蟲 (小有名氣)
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3樓2012-11-22 15:44:56
gyesang
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- 管轄: 分子生物
2樓2012-11-22 14:44:50
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
today521328: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝！幫大忙了，我的目的基因與載體已經(jīng)連接了三天了，定的感受態(tài)細(xì)胞還沒到，怕連接體系有問題，看到你的回答，方向你多了。我16℃連接1-2小時，然后放在4℃已經(jīng)3天了，應(yīng)該沒事吧！謝謝！ 2012-11-23 09:49:47
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
today521328: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝！幫大忙了，我的目的基因與載體已經(jīng)連接了三天了，定的感受態(tài)細(xì)胞還沒到，怕連接體系有問題，看到你的回答，方向你多了。我16℃連接1-2小時，然后放在4℃已經(jīng)3天了，應(yīng)該沒事吧！謝謝！ 2012-11-23 09:49:47
| 我們做連接時放到16度，一直放上個3、4天都沒問題。轉(zhuǎn)化后的感受態(tài)就該直接加LB-液體培養(yǎng)基培養(yǎng)了，培養(yǎng)后的菌液就不算是感受態(tài)了，而是可能含有轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的菌了，然后涂板倒置過夜培養(yǎng)就行了，若是大腸桿菌是37度培養(yǎng)，若是農(nóng)桿菌則是28度，不需要放4度啊。 |
4樓2012-11-22 16:12:55
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