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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 目的基因的連接與轉化
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today521328新蟲 (初入文壇)
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[求助]
目的基因的連接與轉化
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| 求助：目的基因與質粒連接后4℃冰箱可以放多久，我已經放了一天多了，感受態(tài)細胞還沒到，想問下連接體系是不是會有問題。還有 轉化后的感受態(tài)放4℃能放多久�。∞D化后在4℃放兩三天應該可以用吧！謝謝 |
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【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
today521328: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝！幫大忙了，我的目的基因與載體已經連接了三天了，定的感受態(tài)細胞還沒到，怕連接體系有問題，看到你的回答，方向你多了。我16℃連接1-2小時，然后放在4℃已經3天了，應該沒事吧！謝謝！ 2012-11-23 09:49:47
感謝參與，應助指數(shù) +1
today521328: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝！幫大忙了，我的目的基因與載體已經連接了三天了，定的感受態(tài)細胞還沒到，怕連接體系有問題，看到你的回答，方向你多了。我16℃連接1-2小時，然后放在4℃已經3天了，應該沒事吧！謝謝！ 2012-11-23 09:49:47
| 我們做連接時放到16度，一直放上個3、4天都沒問題。轉化后的感受態(tài)就該直接加LB-液體培養(yǎng)基培養(yǎng)了，培養(yǎng)后的菌液就不算是感受態(tài)了，而是可能含有轉化質粒的菌了，然后涂板倒置過夜培養(yǎng)就行了，若是大腸桿菌是37度培養(yǎng)，若是農桿菌則是28度，不需要放4度啊。 |
4樓2012-11-22 16:12:55
gyesang
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2樓2012-11-22 14:44:50
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3樓2012-11-22 15:44:56
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