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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于平末端連接
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liuwei0824新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關于平末端連接 已有3人參與
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大家好！我最近在做平末端連接的實驗，總是做不成功，求教~~ 載體是用smal1酶切的平末端，片段是雙酶切的粘性末端，酶切后，載體進行去磷酸化，片段進行末端補平，然后進行連接反應（16℃過夜），然后轉(zhuǎn)化，平板上都不長菌。。。。 一開始載體是在30度酶切2h，片段在37度酶切2h，跑電泳后發(fā)現(xiàn)，載體只是部分被切開了，然后酶切時間就改成了過夜，結(jié)果都切沒了，，， 所有的酶都用的是Takara公司的。 求高人指點�。。。≈x謝啦O(∩_∩)O~ |
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zhaodahe
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4樓2012-12-24 12:35:12
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3樓2012-12-21 16:15:17
5樓2014-03-25 19:07:03
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