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woody87040金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
蛋白溶液熒光求助
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配置了4gm/ml 的BSA或是LYS的儲(chǔ)備溶液，都是在4度冰箱保存的，做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候取出這儲(chǔ)備溶液20ul，稀釋至4mlPBS中，測(cè)量熒光，為什么做的三組平行試驗(yàn)，熒光的信號(hào)強(qiáng)度差別很大，比如一個(gè)是800左右，一個(gè)是900左右，一個(gè)是700左右？？ 而且這個(gè)配置好的溶液馬上測(cè)量和過(guò)5小時(shí)以后測(cè)量，自身的熒光強(qiáng)度也會(huì)下降？是蛋白質(zhì)不穩(wěn)定的原因么？還是有什么別的原因？？很是費(fèi)解啊~~~~ 求大俠幫助。。。。感激不盡~~ |
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songyuze0319
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2樓2013-01-31 13:43:26
woody87040
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3樓2013-02-01 04:54:20
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5樓2013-02-02 14:42:40
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西湖醉魚(yú): 金幣+1, 歡迎常來(lái)探討問(wèn)題 2013-02-02 23:32:54
西湖醉魚(yú): 金幣+1, 歡迎常來(lái)探討問(wèn)題 2013-02-02 23:32:54
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這些都很正常，熒光比較靈敏，三個(gè)溶液任何一點(diǎn)有所不同，都會(huì)導(dǎo)致熒光信號(hào)差別大。只要做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，三個(gè)溶液的實(shí)驗(yàn)規(guī)律一致就可以了。 熒光是有壽命的，一般能維持2個(gè)小時(shí)左右不變的，然后慢慢就降低了，所以做實(shí)驗(yàn)時(shí)候，配好溶液要做一個(gè)熒光穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)在什么時(shí)間段內(nèi)熒光一致保持一個(gè)比較穩(wěn)定的數(shù)值。 |
6樓2013-02-02 17:12:00
shihuimin256
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