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shiliyusly新蟲 (小有名氣)
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[求助]
QPCR之引物設(shè)計(二)
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大家好，我做QPCR擴(kuò)增效率的時候遇到一個基因，之前測得的CT值是30左右，退火溫度是54度，溶解曲線如圖1。 我現(xiàn)在補(bǔ)做擴(kuò)增效率，體系試劑什么都是一樣的，可是測得的相同樣品的CT值基本都在33左右我試過51-57度退火溫度，擴(kuò)增效率很低，連擬合度都不好，CT值比較低，我用的是2倍稀釋度，怕是稀釋不準(zhǔn)，后來重復(fù)了幾次，但結(jié)果依然不是很好。溶解曲線如圖2。 大家看這是什么原因呢，感覺引物質(zhì)量是還好吧？是要換引物嗎？ 圖2.jpg 圖1.jpg |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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shiliyusly
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4樓2013-03-07 13:13:24
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5樓2013-03-07 13:14:56
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