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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » QPCR之引物設計(二)
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shiliyusly新蟲 (小有名氣)
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[求助]
QPCR之引物設計(二)
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大家好，我做QPCR擴增效率的時候遇到一個基因，之前測得的CT值是30左右，退火溫度是54度，溶解曲線如圖1。 我現(xiàn)在補做擴增效率，體系試劑什么都是一樣的，可是測得的相同樣品的CT值基本都在33左右我試過51-57度退火溫度，擴增效率很低，連擬合度都不好，CT值比較低，我用的是2倍稀釋度，怕是稀釋不準，后來重復了幾次，但結(jié)果依然不是很好。溶解曲線如圖2。 大家看這是什么原因呢，感覺引物質(zhì)量是還好吧？是要換引物嗎？ 圖2.jpg 圖1.jpg |
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