 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 640 | 回復: 3 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
leonvicki銀蟲 (初入文壇)
|
[求助]
若想獲得一個蛋白，如何從基因開始到純化到拿到蛋白
|
||
|
小弟初入生物殿堂，勞煩各位大神寫個詳細的流程，感謝賜教 若想獲得一個蛋白，如何從基因開始到純化到拿到蛋白 |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有82人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復
-
湖北師范大學招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 大腸桿菌BL21菌株表達目的蛋白時，菌液破碎前后的渾濁程度變化很不明顯
已經(jīng)有5人回復
- 畢赤表達一酶基因，跑蛋白電泳只有一條帶，是不是不用純化了呀
已經(jīng)有10人回復
- 蛋白純化標簽有哪些?
已經(jīng)有6人回復
- 想要設(shè)計引物 可是NCBI中blast后只有蛋白序列 如何得到基因序列 謝謝啊
已經(jīng)有15人回復
- 如何在蛋白純化后去除6組氨酸(6His)標簽
已經(jīng)有17人回復
- 蛋白純化遇到問題
已經(jīng)有22人回復
- 蛋白互作必會，GST純化遇到的問題
已經(jīng)有13人回復
- 已經(jīng)帶his標簽?zāi)康牡鞍谆蛉绾卧O(shè)計引物�。康幕蛞呀�(jīng)接在pET-22b的載體上了）
已經(jīng)有8人回復
- 如何得到已知蛋白序列的對應(yīng)的基因序列
已經(jīng)有8人回復
- 如何進一步純化這個蛋白？
已經(jīng)有7人回復
- 求助：關(guān)于基因表達中調(diào)控蛋白和轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白的連接和表達
已經(jīng)有5人回復
- 請教一個全基因組（全蛋白質(zhì)組）和完全基因組（完全蛋白質(zhì)組）之間的差別？
已經(jīng)有8人回復
- 【求助/交流】除了swiss-model還有別的預測基因蛋白三維結(jié)構(gòu)的工具嗎？
已經(jīng)有8人回復
- 【求助/交流】鎳柱純化的蛋白保存在-20度一個星期，拿出來都是沉淀？？
已經(jīng)有19人回復
- 【分享】蛋白質(zhì)純化個人總結(jié)2
已經(jīng)有38人回復
- 【求助/交流】有關(guān)蛋白純化及其基因克隆的問題！請大家?guī)椭?/a>
已經(jīng)有10人回復
- 【求助/交流】SP柱子純化蛋白，蛋白結(jié)合后，用2M NacL都沒有洗脫下來，該怎么辦？
已經(jīng)有5人回復
- 基因帶六個his標簽，蛋白純化時為何掛不上鎳柱
已經(jīng)有26人回復
小科研女dow
木蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 21 (小學生)
- 金幣: 3823.2
- 散金: 20
- 紅花: 2
- 帖子: 187
- 在線: 163.4小時
- 蟲號: 2112648
- 注冊: 2012-11-07
- 性別: MM
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+5, 總結(jié)的很詳細，一目了然，鼓勵應(yīng)助，期待更多精彩的回答！ 2013-03-15 00:34:01
小丹木木: 金幣+2, MolEPI+1, 詳細，熱心，鼓勵給予EPI 2013-03-15 08:04:36
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+5, 總結(jié)的很詳細，一目了然，鼓勵應(yīng)助，期待更多精彩的回答！ 2013-03-15 00:34:01
小丹木木: 金幣+2, MolEPI+1, 詳細，熱心，鼓勵給予EPI 2013-03-15 08:04:36
|
簡單說幾句撒 1 首先知道了序列后設(shè)計引物 2 做引物PCR 3 電泳驗證序列大小 4 切膠回收 5 與T載體連接后轉(zhuǎn)換涂平板 6 依據(jù)平板菌落做菌落PCR 7 電泳驗證菌落PCR結(jié)果選擇正確的單菌落送去測序 8 測序結(jié)果在NCBI上BLAST證明為你所要的序列 9 挑測序正確的單菌落姐試管或者搖瓶后進行質(zhì)粒中提 10 再做引物PCR 11回收PCR產(chǎn)物 12 將回收片段與所要載體進行雙酶切 12 連接轉(zhuǎn)化進入感受態(tài)后涂平板 13 質(zhì)粒中提 轉(zhuǎn)化進入表達感受態(tài)中 14 誘導表達 15 細胞破碎（胞內(nèi)產(chǎn)物的話）得到粗蛋白 16 蛋白純化（若有HIS過鎳柱純化，若無，硫酸銨梯度純化） 17 得到純化后的蛋白為你所用 PS：與T載體連接的一步可有可無。若急于知道是否序列正確，可先這樣做。 |
3樓2013-03-14 22:00:19
云琪
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2.6
- 散金: 20
- 帖子: 92
- 在線: 81.2小時
- 蟲號: 1265004
- 注冊: 2011-04-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2013-03-14 20:06:29
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
4樓2013-03-15 01:47:49
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300化學279求調(diào)劑 +3 | 哈哈哈^_^ 2026-03-31 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +4 | xiao愛同學 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +17 | 田洪有 2026-03-26 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 08工科，295，接受跨專業(yè)調(diào)劑 +3 | lmnlzy 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑，一志愿西北工業(yè)大學，材料工程（085601） +5 | 小小機靈蟲 2026-03-29 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0703本科鄭州大學求調(diào)劑 +7 | nhj_ 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +21 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +8 | 楒桉 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +15 | Micky11223 2026-03-25 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 種圣賜 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8 | 邱gl 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 081200-314 +3 | LILIQQ 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3 | Qiu學ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿南師大0703化學 275求調(diào)劑 +4 | Ripcord上岸 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +3 | 溪云珂 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +4 | gajsj 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|