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乖乖寶貝金蟲 (小有名氣)
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[求助]
WB條帶總是不太整齊
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最近做WB，不管是內(nèi)參還是目的條帶，總是幾條出現(xiàn)波浪或者是毛邊現(xiàn)象。想求助遇到類似情況的同學(xué)，都是怎么解決的！謝謝啦……附圖 KZ7GS472RH@2]Z$Q7C6E%XC.jpg LR}RFV1VDP{S`{B9PKD]J@H.jpg U46N4BO7U$Y5$({FPWGN`NL.jpg |
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7樓2013-03-25 14:01:27
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
乖乖寶貝: 金幣+5, ★有幫助, 謝謝你的答復(fù)，忽然間覺得pH真的好重要！我每次跑膠都有那么些條帶不好看。 2013-03-24 13:20:22
wizardfan: 金幣+3, 謝謝分析 2013-03-25 08:49:29
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wizardfan: 金幣+3, 謝謝分析 2013-03-25 08:49:29
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出來膠帶說明其他的都沒有問題，marker也是正常的。可以從以下幾個(gè)途徑改變 一 ：試著看下當(dāng)時(shí)配置濃縮膠和分離膠的參數(shù)比例，是不是和你要測的蛋白質(zhì)樣品的分子量大小合適，這個(gè)可以參考相關(guān)文獻(xiàn)或者有蛋白質(zhì)樣品對照庫里面有配置濃度的指導(dǎo)。 二：就是膠帶里位置梯度的PH濃度是否合理，分離膠的濃度一般情況下比較低，所以合適的PH也是做出perfect膠的利器。 三：就是所選用的染料或自發(fā)熒光的問題，選擇性的使用考馬斯亮藍(lán)R-250通常，銀鹽染料，violet17或者溴化乙錠等染色，這個(gè)你可以看一下之前的實(shí)驗(yàn)是怎么進(jìn)行的。 四：可能是你的膠帶分離后暗室X放射自顯的時(shí)候沒有曝光好。 五：當(dāng)時(shí)梳子的之后注射混進(jìn)去微小的氣泡，導(dǎo)致膠帶不均勻。 最差的就是和之前有人提供的一樣，一些試劑可能是假冒偽劣產(chǎn)品，也不排除這種情況。 期待小蟲子能跑出完美漂亮的條帶，再發(fā)個(gè)美美的paper。 |
4樓2013-03-24 12:20:55
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