 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3989 | 回復(fù): 15 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
連接轉(zhuǎn)化不長(zhǎng)菌是怎么回事？？？
|
|||
| 連接1.5KB的片段 轉(zhuǎn)化后涂平板不長(zhǎng)菌 是怎么回事？？？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有136人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- pET28a與目的基因連接后轉(zhuǎn)化長(zhǎng)滿菌
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 長(zhǎng)片段的連接轉(zhuǎn)化問(wèn)題，望大俠們賜教！
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 大腸桿菌感受態(tài)加甘油至50%會(huì)不會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)化效率有影響？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- PCR 連接轉(zhuǎn)化不長(zhǎng)菌
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)化大腸桿菌平板出現(xiàn)衛(wèi)星菌落是怎么回事？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 雙酶切后目的條帶的疑問(wèn)？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 連接轉(zhuǎn)化后挑菌落，測(cè)序是混合克隆，是怎么回事？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 為什么最近做連接轉(zhuǎn)化總是失敗
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 做酶切連接后轉(zhuǎn)化再提質(zhì)粒，質(zhì)粒明顯變小，Why???
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 連接轉(zhuǎn)化不成功問(wèn)題
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 連接轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 連接轉(zhuǎn)化進(jìn)大腸桿菌BL21
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 目的片段和T1載體連接后轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞涂板子總不長(zhǎng)菌……
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 用clontech的SMART建cDNA文庫(kù)，連接轉(zhuǎn)化不成功，求助！！急死了�。�！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 為什么連接這么難呢？
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 克隆基因和載體連接后轉(zhuǎn)化至大腸桿菌，為什么每次涂板都是空平板沒(méi)有菌落？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 酶連之后如何檢測(cè)？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】連接轉(zhuǎn)化長(zhǎng)菌有質(zhì)粒，但是沒(méi)有目的片段，怎么回事？？
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因連接表達(dá)載體后涂板不長(zhǎng)菌
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)外源基因
已經(jīng)有18人回復(fù)
collinbush
金蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1044.5
- 紅花: 1
- 帖子: 33
- 在線: 37.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 150759
- 注冊(cè): 2005-12-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2013-04-11 17:18:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2013-04-11 17:18:55
|
可能原因有: 酶切問(wèn)題，由于未長(zhǎng)菌落，載體未切開(kāi)的可能性較小，但片段可能沒(méi)切開(kāi)，或其中一個(gè)切開(kāi)了，另一個(gè)未切開(kāi)，建議pcr產(chǎn)物直接聯(lián)PMD18T載體測(cè)序，再?gòu)腡載體上酶切回收目的片段，另通過(guò)T載體測(cè)序分析，還可以看一下引物是否正常，我們就遇到過(guò)引物出問(wèn)題的情況。 連接問(wèn)題，鑒于片段較大，調(diào)整載體與片段比例，重新連接，當(dāng)然必須保證連接酶首先沒(méi)問(wèn)題。 轉(zhuǎn)化問(wèn)題：感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率如何，建議驗(yàn)證一下，建議作空載體轉(zhuǎn)化對(duì)照。 |
7樓2013-04-11 14:23:21
lidonghong
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 116 (高中生)
- 金幣: 2071.8
- 散金: 21
- 紅花: 2
- 帖子: 403
- 在線: 167.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1098160
- 注冊(cè): 2010-09-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
2樓2013-04-10 08:58:39
guaiyaya
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 74.7
- 帖子: 26
- 在線: 20.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1921958
- 注冊(cè): 2012-08-02
- 性別: MM
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
3樓2013-04-10 09:36:25
德國(guó)工兵鏟
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 54 (初中生)
- 金幣: 894.4
- 散金: 10
- 紅花: 2
- 帖子: 168
- 在線: 102.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 581720
- 注冊(cè): 2008-07-18
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
4樓2013-04-10 10:20:25
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
