 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1856 | 回復(fù): 7 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
chenxiang29銀蟲 (正式寫手)
|
[求助]
pET-22b構(gòu)建好了質(zhì)粒，表達(dá)不出來？
|
|
|
構(gòu)建好了之后IPTG誘導(dǎo)不成功，翻開以前跑的電泳圖，感覺構(gòu)建好的重組質(zhì)粒大小理論上是6000bp左右，當(dāng)然是超螺旋，但是電泳卻是3000bp多，附圖1（M,重組質(zhì)粒1,2，pET-22b）,不知道各位蟲友出現(xiàn)過這種問題么，酶切后是在5000以上，附圖2(只看line3 為雙酶切，line 5為 pet22b雙酶切) |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有166人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 目的基因連接表達(dá)載體的質(zhì)粒PCR驗(yàn)證，結(jié)果出現(xiàn)2條帶
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 重組質(zhì)粒提出來看不到，PC顯示目的條帶已插入，求助
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)不出來是怎么回事？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)化后提不出質(zhì)粒
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 質(zhì)粒酶切切不動(dòng)，質(zhì)粒在宿主中繁衍酶切位點(diǎn)會(huì)突變么？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 相同質(zhì)粒，不同的單克隆有的不能表達(dá)？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 真核表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 關(guān)于農(nóng)桿菌單菌株/雙質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 菌株構(gòu)建成功后，再復(fù)蘇保存的菌種，提不出質(zhì)粒，怎么辦？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 提不出質(zhì)粒，不知道出了什么問題，求助……
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 求助：用pXMJ19構(gòu)建的重組質(zhì)粒在谷氨酸棒桿菌不表達(dá)，應(yīng)該如何解決？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 有人提取過PET-28a的質(zhì)粒嗎？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】表達(dá)載體轉(zhuǎn)化后,提取的質(zhì)粒和原來不一樣了啊
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】大腸桿菌轉(zhuǎn)化質(zhì)粒，出來的不是我要的了，怎么回事？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于PEt-28a質(zhì)粒載體表達(dá)蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】誘導(dǎo)pkd46質(zhì)粒表達(dá)不出目的蛋白
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于質(zhì)粒構(gòu)建與表達(dá)的問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時(shí)
- 蟲號(hào): 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2013-05-01 03:00:05
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時(shí)
- 蟲號(hào): 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2013-04-30 11:46:40
chenxiang29
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 302.1
- 散金: 70
- 紅花: 2
- 帖子: 576
- 在線: 215.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 1252309
- 注冊: 2011-04-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)
3樓2013-04-30 12:40:38
stevenshi021
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 61 (初中生)
- 金幣: 545.3
- 紅花: 5
- 帖子: 276
- 在線: 35.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 2272292
- 注冊: 2013-02-03
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1<br>chenxiang29: 金幣+5, <font color=red>★★★</font>很有幫助 <font color="gray">2013-05-01 11:11:23</font>
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊�？鞓访恳惶� 2013-05-01 12:06:34
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1<br>chenxiang29: 金幣+5, <font color=red>★★★</font>很有幫助 <font color="gray">2013-05-01 11:11:23</font>
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊�？鞓访恳惶� 2013-05-01 12:06:34
|
蛋白表達(dá)不成功有很多原因,在排除基因序列問題之外一般有以下原因: 1 目的基因來源,特別對來在于真核生物的蛋白,在原核生物中表達(dá)一般需要看看稀有密碼子之類的東西,如果存在大量連續(xù)的稀有密碼子,則一般表達(dá)不成功 2 你所謂的表達(dá)不成功是看的總蛋白還是純化蛋白,需要對表達(dá)細(xì)胞的總蛋白,可溶蛋白和不溶蛋白最好跑膠時(shí)候有非誘導(dǎo)的樣品進(jìn)行對照 3 最后就是宿主細(xì)胞了,有時(shí)候不同的宿主細(xì)胞也會(huì)影響蛋白表達(dá),常用的有BL21, Rosseta, gammi,什么之類的DE3菌 蛋白表達(dá)問題很多的，如果可以做個(gè)WB確定一下，是蛋白不能表達(dá)還是表達(dá)量低。 希望對你有用！ |
5樓2013-05-01 10:31:56
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288求調(diào)劑，一志愿華南理工大學(xué)071005 +4 | ioodiiij 2026-03-17 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 環(huán)境領(lǐng)域全國重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收博士1-2名 +3 | QGZDSYS 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +3 | 妮妮ninicgb 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +5 | 大米飯！ 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294求調(diào)劑 +3 | Zys010410@ 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 學(xué)海漂泊 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +9 | Koxui 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 328化工專碩求調(diào)劑 +4 | 。，。，。，。i 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 309分請求調(diào)劑 +7 | dtdxzxx 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑，材料、化工皆可 +8 | 蘇打水7777 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑（食品/專碩） +3 | xc321 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 26讀博 +4 | Rui135246 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 152697 2026-03-12 | 4/200 |
|