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關于DNase1 去除提取的RNA中基因組DNA的問題 已有2人參與
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從細胞中提取的RNA,逆轉錄后PCR，沒有轉染質粒的細胞也總是可以擴增出我的目的條帶，這是什么原因？ 還有就是通過DNase1 可以去除基因組DNA嗎？去除后可以直接逆轉錄嗎，還是得純化后逆轉錄，那TAKARA的說明書實在是太復雜了。貌似第三步去除了基因組DNA后，第四步又開始了純化，實在是沒明白，求助大俠幫忙�。。�！ |
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bullfrog325
木蟲 (正式寫手)
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提取的RNA沒有經(jīng)過DNase I消化的話肯定會有gDNA殘留的。 進行DNase I 消化后，是直接進行反轉錄或是再重新純化這取決于你的DNase I kit。 但進行滅活剩余的DNase I 是必須的，否則會將反轉錄合成的DNA也酶切掉。有些公司的可以稍為加熱滅活，有的公司加入一些失活劑，或者重新抽提一次。 向實驗室做過此類實驗的師兄師姐取取經(jīng)... |
5樓2013-05-20 09:12:12
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wangqi1107
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