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新蟲 (初入文壇)

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[求助] 半纖維素酶活的測定方法

請教各位大神半纖維素酶活的測定方法，具體操作步驟。PS: 不是纖維素酶活，是叫一個什么Xyl**的測定方法，謝謝！

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【求助】超氧化物歧化酶活性測定方法已經(jīng)有5人回復(fù)

1樓 2013-05-28 10:57:05

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新蟲 (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

半纖維素酶活性的測定方法:
試驗中采用DNS (3,5-二銷基水楊酸)顯色法,主要檢測木聚糖酶活力。標(biāo)準(zhǔn)曲線為木糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線。取0.1 mL適當(dāng)稀釋酶液,加入0.9rnL 0.1mol/LpH4.8的醋酸緩沖溶液配制成的1%木聚糖溶液,50 ͦ C下反應(yīng)60min,用DNS法測定還原糖。用空白調(diào)零點,于550mn下測得0D值。定義每分鐘釋放1umol還原糖所需的酶量為1個酶活單位U。
半纖維素酶的活性力單位用下式計算:
半纖維素酶的活性力=A*D*10*1000/60 U/g(干樣)
式中:A——OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上對應(yīng)的木糖量(mg)
D——酶液稀釋倍數(shù)
這個方法不知道怎么樣，我試過，你也可以用用，不過木聚糖溶液的配置要先用氫氧化鈉溶液溶解木聚糖，再加醋酸調(diào)PH至4.8，

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