 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1328 | 回復(fù): 13 | ||
wjw3188木蟲 (著名寫手)
|
[求助]
表達載體構(gòu)建
|
|
|
大家好，最近做表達出現(xiàn)了一點問題：首先，我將片段連接到T載體上，然后用相應(yīng)酶（Bgl I 和Kpn I）酶切下來，回收后連接到載體pET-32a上，用T7引物PCR擴增，有目標條帶，且單一明亮，可是提取質(zhì)粒后，用同樣的酶進行雙酶切卻切不開，不知道為什么？？？當(dāng)初選擇酶切位點的時候請教了別人，告訴我pET-32a上的酶切位點可以挨著，因為覺得保證載體的完整性會好一點，所以我就選擇了兩個挨著的酶切位點，現(xiàn)在切不開是不是因為這個，還是其他原因？求高手解答�。� [ 來自小組 Rose Family ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有256人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- RNAi表達載體構(gòu)建后，酶切切不開，怎么回事？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【緊急！】真核表達載體構(gòu)建知識請教
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 目的基因的導(dǎo)入
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 目的基因表達載體的構(gòu)建問題~請指教
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 如何進行表達載體構(gòu)建
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 表達載體構(gòu)建 堿基突變 缺失 原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 原核表達載體的構(gòu)建
已經(jīng)有37人回復(fù)
- 構(gòu)建了個基因的表達載體，發(fā)現(xiàn)有一個氨基酸發(fā)生突變
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 原核表達載體構(gòu)建，測序不成功
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 兩個基因融合構(gòu)建真核表達載體需要去掉信號肽嗎?
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 構(gòu)建pBI121表達載體，目的基因與載體連接不上
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 關(guān)于農(nóng)桿菌單菌株/雙質(zhì)粒表達載體的構(gòu)建問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 關(guān)于SiRNA表達載體構(gòu)建的問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 表達載體的構(gòu)建
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 表達載體構(gòu)建的相關(guān)問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 已知全長基因怎樣克隆并構(gòu)建表達載體
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】表達載體轉(zhuǎn)化后,提取的質(zhì)粒和原來不一樣了啊
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于基因過表達的
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】釀酒酵母表達載體的構(gòu)建問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】表達載體構(gòu)建不成功的原因
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【求助/交流】在構(gòu)建基因表達載體的時候什么時候需要人為地在上面加上啟動子？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】連接表達載體PET-28A失敗原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 【求助/交流】物過量表達載體可否以基因組DNA進行
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】釀酒酵母真核表達載體構(gòu)建和連接的問題
已經(jīng)有6人回復(fù)
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時
- 蟲號: 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2013-06-18 01:02:07
wjw3188
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4688.3
- 散金: 110
- 紅花: 4
- 帖子: 1038
- 在線: 385.9小時
- 蟲號: 761161
- 注冊: 2009-05-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 法學(xué)其他學(xué)科
8樓2013-06-29 11:26:29
ivyvampire
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 32 (小學(xué)生)
- 金幣: 266.1
- 散金: 71
- 紅花: 7
- 帖子: 686
- 在線: 541.4小時
- 蟲號: 1716889
- 注冊: 2012-03-26
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
3樓2013-06-18 13:01:16
冰風(fēng)顫木
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 2618
- 散金: 35
- 紅花: 4
- 帖子: 612
- 在線: 174.8小時
- 蟲號: 1424985
- 注冊: 2011-10-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物藥物
4樓2013-06-20 11:05:44
5樓2013-06-20 12:03:45
wjw3188
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4688.3
- 散金: 110
- 紅花: 4
- 帖子: 1038
- 在線: 385.9小時
- 蟲號: 761161
- 注冊: 2009-05-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 法學(xué)其他學(xué)科
6樓2013-06-29 11:25:02
wjw3188
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4688.3
- 散金: 110
- 紅花: 4
- 帖子: 1038
- 在線: 385.9小時
- 蟲號: 761161
- 注冊: 2009-05-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 法學(xué)其他學(xué)科
7樓2013-06-29 11:25:42
wjw3188
木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 4688.3
- 散金: 110
- 紅花: 4
- 帖子: 1038
- 在線: 385.9小時
- 蟲號: 761161
- 注冊: 2009-05-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 法學(xué)其他學(xué)科
9樓2013-06-29 11:27:38
冰風(fēng)顫木
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 2618
- 散金: 35
- 紅花: 4
- 帖子: 612
- 在線: 174.8小時
- 蟲號: 1424985
- 注冊: 2011-10-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物藥物
10樓2013-06-29 12:32:53
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 wjw3188 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(333分) +7 | holy J 2026-03-21 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 某某某某位 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 小羊睡著了? 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工328分調(diào)劑 +4 | 。，。，。，。i 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求調(diào)劑 +3 | gdlf9999 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 26申博自薦 +3 | whh869393 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +4 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +7 | 梁茜雯 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +12 | 申子申申 2026-03-19 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 289材料與化工（085600）B區(qū)求調(diào)劑 +3 | 這么名字咋樣 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +5 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +10 | Faune 2026-03-21 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +9 | 煙火先于春 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請]
學(xué)校已經(jīng)提交到NSFC，還能修改嗎？
 40+4
|
babangida 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學(xué)）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計算機技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|