 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2309 | 回復(fù): 13 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
MOQIA1989新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
載體酶切位點(diǎn)與目的片段重復(fù)
|
|
| 第一次做分子實(shí)驗(yàn)，選擇了PMD-19T載體，連接目的片段后，再亞克隆到PET-28a上，現(xiàn)在遇到了個問題，就是當(dāng)時在設(shè)計引物加酶切位點(diǎn)時，只考慮到了PET-28a和目的片段，設(shè)計出的酶切位點(diǎn)在PMD-19T上都有，怎么吧啊，可以用嗎，加的位點(diǎn)是HindⅢ和EcoRⅠ。。。。大家?guī)蛶兔Π�。。�? |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
349求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
329求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601）
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
327求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
求收留
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
375求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
340求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
298求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085601材料工程找調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 請教一些原核表達(dá)的問題。
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 構(gòu)建表達(dá)載體PBI121陽性對照
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 目的基因構(gòu)建載體方向問題概念有點(diǎn)不清楚，請教各位大俠
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 有沒有用過XmnI這個酶的?酶切后連接需要注意什么問題么？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- PGAPZA載體的使用
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 雙酶切后目的片段變大
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 目的片段中含有酶切位點(diǎn)，求解決方案
已經(jīng)有3人回復(fù)
- pET28a載體和目的基因
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 雙酶切后載體片段變小
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 雙酶切，切不下來
已經(jīng)有19人回復(fù)
- T載體酶切片段與目的片段大小不一致
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 請問用Vector NTI如何實(shí)現(xiàn)在pET28a中加入目的基因片段的譜圖繪制。
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 做酶切連接后轉(zhuǎn)化再提質(zhì)粒，質(zhì)粒明顯變小，Why???
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 載體連接
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】TA克隆
已經(jīng)有15人回復(fù)
MOQIA1989
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 帖子: 18
- 在線: 6.7小時
- 蟲號: 2509261
- 注冊: 2013-06-15
- 專業(yè): 病原細(xì)菌與放線菌生物學(xué)
9樓2013-06-25 13:23:27
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhangxingc: 金幣+3, 鼓勵新蟲應(yīng)助，歡迎常到微生物版 2013-06-25 11:41:38
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhangxingc: 金幣+3, 鼓勵新蟲應(yīng)助，歡迎常到微生物版 2013-06-25 11:41:38
|
和我用的酶切位點(diǎn)是一樣的，我用了pEt28a+ PMD-19T載體應(yīng)該只是一個保留這個目的片段的把？用PCR擴(kuò)增，設(shè)計引物，這時候引物就該注意點(diǎn)了，引物就包括ECORI 和HindIII酶切位點(diǎn)最好再弄點(diǎn)你們的目標(biāo)基因的片段，要不然估計會把PMD-19T的基因給擴(kuò)增出來，這樣子就只擴(kuò)增含有酶切位點(diǎn)的目標(biāo)基因了，然后瓊脂糖電泳一下看看有沒有擴(kuò)增出來目標(biāo)基因。 隨后目標(biāo)基因和pEt28a+同時進(jìn)行雙酶切，DNA連接酶16℃連接過夜，然后再做一個瓊脂糖電泳，一個是連接之后的，還有一個是沒有連接的目標(biāo)基因和pet28a都進(jìn)行酶切之后的混合液，跑完電泳看看有沒有順利連接就好了。 |
2樓2013-06-25 11:34:00
MOQIA1989
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 帖子: 18
- 在線: 6.7小時
- 蟲號: 2509261
- 注冊: 2013-06-15
- 專業(yè): 病原細(xì)菌與放線菌生物學(xué)
3樓2013-06-25 12:36:06
kehuang611
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: -1.4
- 散金: 8
- 帖子: 83
- 在線: 39.8小時
- 蟲號: 2427552
- 注冊: 2013-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生態(tài)學(xué)
4樓2013-06-25 12:56:09
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +7 | WW.' 2026-03-23 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 崔wj 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 11408軟件工程求調(diào)劑 +3 | Qiu學(xué)ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +7 | 宋明欣 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +7 | 1428151015 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京工業(yè)大學(xué)，324分求調(diào)劑 +4 | 零八# 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +7 | 孅華 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 張zz111 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +11 | 陽陽哇塞 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +8 | 超級伊昂大王 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +17 | 碩星赴 2026-03-23 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求調(diào)劑 +4 | 李李不服輸 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 材料考研調(diào)劑生
+3
|
黃粱一夢千年 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當(dāng)牛 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|