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ginnyzhuzhu新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助western-blot實驗前的準備工作？一抗二抗怎么確定？
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| 我在做真核原核表達，蛋白檢測想用western-blot,但是現(xiàn)在實驗室沒有師兄師姐會，想請教一下實驗之前需要準備什么，一抗二抗怎么確定？是設(shè)計好讓生物公司合成嗎？要怎么設(shè)計呢？ |
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xiaopingzi22
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3樓2013-12-07 23:06:03
cicelyzh
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ginnyzhuzhu: 金幣+3, ★★★很有幫助, 謝謝吶~ 2013-07-14 10:47:38
| 你需要制備蛋白樣品，跑SDS-PAGE，轉(zhuǎn)膜，封閉，然后用抗體孵育，最后顯影。如果你做的表達帶標簽，一般公司有賣抗標簽的一抗，直接買就行了。二抗是根據(jù)一抗的來源，常見的是鼠或者兔的，選擇抗一抗IgG的抗體，來源無所謂。二抗是偶聯(lián)酶的，常用的有過氧化物酶或者堿性磷酸酶。 |
2樓2013-07-12 11:55:13
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