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[求助]
求助熒光定量引物驗(yàn)證？
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大家好，最近做了關(guān)于熒光定量PCR的文章，在做熒光定量PCR的時(shí)候，設(shè)計(jì)了一個(gè)引物，審稿人提出意見說建議我重新設(shè)計(jì)引物，也就是懷疑我的引物有問題。我不解的是，我做熔解曲線是單峰，而且通過電泳和熔解曲線都說明，引物特異性很好�。ㄖ皇俏恼轮形覜]有將熔解曲線的圖附上），我為了驗(yàn)證引物的特異性，我又對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序分析，比對結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與目的序列的同源性很高。我想使用熔解曲線和測序結(jié)果可以回答審稿人問題了嗎？謝謝大家賜教！ |
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cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wzc4884(myprayer代發(fā)): 金幣+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-15 10:45:48
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wzc4884(myprayer代發(fā)): 金幣+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-15 10:45:48
| 你先仔細(xì)檢查一下審稿人為什么說你的引物不行，需要重新設(shè)計(jì)。如果的確是懷疑引物的特異性，你自己確定引物沒有問題，可以用熔解曲線和測序結(jié)果來回答審稿人的問題。 |
2樓2013-07-15 01:35:02
3樓2013-07-15 07:36:11
4樓2013-07-15 16:34:10
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