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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » HPLC酶活測定
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longyh6411金蟲 (小有名氣)
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[求助]
HPLC酶活測定
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HPLC酶活測定底物是否也是要色譜純的呢？底物和生成物都需要測定嗎？還有底物和底物的標準品使用一樣的藥品呢還是需要分別買？ [ Last edited by longyh6411 on 2013-7-23 at 20:42 ] |
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longyh6411: 金幣+50, ★有幫助 2013-09-18 16:17:30
感謝參與，應助指數(shù) +1
longyh6411: 金幣+50, ★有幫助 2013-09-18 16:17:30
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問的有些籠統(tǒng)了，不太知道你到底想了解什么 嘗試著回答一下了： 1. 你做這個實驗的目的是什么？想知道轉化率還是酶活？這是兩個完全同的方法：酶活的話，你需要in situ的做法，這個要求你要能夠控制好反應體系的反應速率，否則你計算出的Km和Vmax誤差較大。如果你測量轉化率，只需要注意測量精度和反應時間了。 2. 如果是活性測量，只需要關注一個。如果你是側轉化率，需要兩個都做，然后用守恒來驗證你測量的正確與否。 3. 至于底物，取決于你用什么了，這個沒有定論。 |
2樓2013-07-23 21:16:07
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