 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1557 | 回復(fù): 3 | ||||
dirtyangle新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
空氣中氧化能增加由二硫鍵形成的二聚體蛋白質(zhì)的量嗎
|
| 我現(xiàn)在做的蛋白是個(gè)二聚體，現(xiàn)在跑非還原電泳能看到二聚體，但是量不多，想用空氣中氧化的辦法增加二聚體的量，不知道各位大人們有知道這個(gè)方法的嗎，有沒(méi)有相關(guān)論文呢？ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有180人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 二聚體的分離---分子量1000
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 蛋白形成多聚體
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 想通過(guò)SPDP連接蛋白質(zhì)和多肽，加入DTT會(huì)破壞蛋白質(zhì)本身的二硫鍵嗎
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 如何打開(kāi)二硫鍵？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 蛋白質(zhì)交聯(lián)，那種物質(zhì)可以促進(jìn)蛋白質(zhì)的硫氫鍵轉(zhuǎn)化成二硫鍵
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 蛋白質(zhì) 熱變性 的原理是什么呢
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 蛋白質(zhì)二硫鍵的形成
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 非還原性SDS-PAGE驗(yàn)證二硫鍵存在分析，請(qǐng)高人指點(diǎn)
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 巰基化后形成多多聚體
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 蛋白濃縮沉淀？二硫鍵？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 關(guān)于變性條件下his-tag重組融合蛋白不結(jié)合鎳柱以及部分結(jié)合鎳柱情況
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 二聚體變性后成單體嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 原核表達(dá) PET-30載體 目的蛋白分子量偏��？
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 半胱氨酸的氧化
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 純化后的蛋白做western，出現(xiàn)很明顯的兩條帶，請(qǐng)問(wèn)是二聚體嗎？怎么打開(kāi)成單體？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助】打斷蛋白中二硫鍵的方法
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】DMF（二甲基甲酰胺）可能將多肽中Cys（半胱氨酸）的巰基氧化而形成二硫鍵嗎
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚體嗎？
已經(jīng)有15人回復(fù)
fuyuandj86
版主 (著名寫(xiě)手)
己所不欲，勿施于人
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.015
- 金幣: 7575.7
- 散金: 493
- 紅花: 60
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1312
- 在線: 1386.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 544795
- 注冊(cè): 2008-04-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
- 管轄: 生物科學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-08-24 02:09:08
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流！ 2013-08-24 02:09:08
|
我讀過(guò)有文章研究蛋白的還原態(tài), 先用DTT把蛋白所有的二硫鍵斷開(kāi), 然后過(guò)柱子除去過(guò)量DTT, 接下來(lái)為了保證Cystine不會(huì)在沒(méi)有DTT的情況下重新形成二硫鍵,就在完全無(wú)氧的情況下進(jìn)行試驗(yàn). 既然為了防止二硫鍵重新生成, 需要在完全無(wú)氧的條件下操作,想必氧氣是可以增加二硫鍵的 不過(guò)謹(jǐn)慎懷疑作用有限. 你如果想用氧氣飽和的緩沖液試下也無(wú)妨,無(wú)非就是先往緩沖液里吹10分鐘氧氣,攪拌加冒泡.我以前有這么做過(guò),氧氣在冷水里的溶解度還是不錯(cuò)的 |
2樓2013-08-23 22:05:13
凌波麗
專家顧問(wèn) (知名作家)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1766465
- 注冊(cè): 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
dirtyangle(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-08-24 02:09:18
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
dirtyangle(gyesang代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-08-24 02:09:18
|
二硫鍵會(huì)在氧氣中形成，有氧催化巰基生成二硫鍵。所以要防止氧化，一是將反應(yīng)器皿放入充氮的容器，二是用碘乙酸等封閉巰基，以后再去掉。 二硫鍵的形成本身就會(huì)加快或者一定程度上改變蛋白質(zhì)的折疊構(gòu)象或者折疊過(guò)程，而不是像過(guò)去認(rèn)為的那樣，二硫鍵形成只是被動(dòng)的穩(wěn)定三維構(gòu)象。 |
3樓2013-08-23 23:05:48
凌波麗
專家顧問(wèn) (知名作家)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +218 - MolEPI: 44
- 應(yīng)助: 397 (碩士)
- 貴賓: 0.044
- 金幣: 2118.9
- 散金: 10
- 紅花: 208
- 帖子: 5633
- 在線: 571.6小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1766465
- 注冊(cè): 2012-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)綜合
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
dirtyangle(gyesang代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-08-24 02:09:26
dirtyangle(gyesang代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-08-24 02:09:26
| 如果操作時(shí)間短可以加入放映體系中以Beta-巰基乙醇或DTT，但是時(shí)間長(zhǎng)了也不行，而且要考慮Beta-巰基乙醇或DTT可能有其他影響，尤其是后期要是用凝膠電泳進(jìn)行染色的話，Beta-巰基乙醇可能對(duì)一些染料會(huì)有影響（比如銀染有時(shí)可能會(huì)受到影響），染色前最好用超濾去掉，那時(shí)離心機(jī)最好在封閉的充氮環(huán)境中運(yùn)行。 |
4樓2013-08-23 23:09:55
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 dirtyangle 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +7 | S.H1 2026-03-18 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠(chéng)心求調(diào)劑 +6 | 吃吃吃才有意義 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +10 | 墨墨漠 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +8 | 何潤(rùn)采123 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +11 | yangfz 2026-03-17 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0817調(diào)劑 +3 | 沒(méi)有答案_ 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 本科鄭州大學(xué)物理學(xué)院，一志愿華科070200學(xué)碩，346求調(diào)劑 +4 | 我不是一根蔥 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +5 | 想上岸的鯉魚(yú) 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +11 | zjl的號(hào) 2026-03-16 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 有沒(méi)有道鐵/土木的想調(diào)劑南林，給自己招師弟中～ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時(shí)間點(diǎn) 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +4 | 諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)覬?/a> 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
今年的國(guó)基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調(diào)劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|