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dirtyangle新蟲 (初入文壇)
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[求助]
空氣中氧化能增加由二硫鍵形成的二聚體蛋白質(zhì)的量嗎
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| 我現(xiàn)在做的蛋白是個二聚體，現(xiàn)在跑非還原電泳能看到二聚體，但是量不多，想用空氣中氧化的辦法增加二聚體的量，不知道各位大人們有知道這個方法的嗎，有沒有相關(guān)論文呢？ |
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凌波麗
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4樓2013-08-23 23:09:55
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【答案】應(yīng)助回帖
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我讀過有文章研究蛋白的還原態(tài), 先用DTT把蛋白所有的二硫鍵斷開, 然后過柱子除去過量DTT, 接下來為了保證Cystine不會在沒有DTT的情況下重新形成二硫鍵,就在完全無氧的情況下進行試驗. 既然為了防止二硫鍵重新生成, 需要在完全無氧的條件下操作,想必氧氣是可以增加二硫鍵的 不過謹(jǐn)慎懷疑作用有限. 你如果想用氧氣飽和的緩沖液試下也無妨,無非就是先往緩沖液里吹10分鐘氧氣,攪拌加冒泡.我以前有這么做過,氧氣在冷水里的溶解度還是不錯的 |
2樓2013-08-23 22:05:13
凌波麗
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3樓2013-08-23 23:05:48
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