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[求助] PCR出現(xiàn)雜帶

我最近正在P一個(gè)基因，電泳點(diǎn)樣量為5ul 時(shí) 可以看到單一條帶，但是我有一天換用大梳子，點(diǎn)了8ul 的樣，竟然發(fā)現(xiàn)在這條很亮的條帶前后都有雜帶。。。這樣的現(xiàn)象算是正常的嗎？
謝謝！

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1樓 2013-09-12 10:59:54

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zhangxn2010

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5ul和8ul應(yīng)該不會(huì)有這么大差別啊，不過(guò)上樣量多了雜帶更清晰也屬正常。
并且每次PCR條件不一樣，這也不一定是上樣量的問(wèn)題。

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2樓2013-09-12 12:50:11

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引用回帖:

2樓: Originally posted by zhangxn2010 at 2013-09-12 12:50:11
5ul和8ul應(yīng)該不會(huì)有這么大差別啊，不過(guò)上樣量多了雜帶更清晰也屬正常。
并且每次PCR條件不一樣，這也不一定是上樣量的問(wèn)題。

我每次設(shè)置的條件是一樣的所以我就在懷疑這3ul 的上樣量真的會(huì)有這么大的影響嗎

？

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3樓2013-09-12 13:14:17

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引用回帖:

3樓: Originally posted by zhghlj at 2013-09-12 13:14:17
我每次設(shè)置的條件是一樣的所以我就在懷疑這3ul 的上樣量真的會(huì)有這么大的影響嗎

？...

會(huì)不會(huì)是后來(lái)上樣中間有DNA降解現(xiàn)象？

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4樓2013-09-13 14:16:20

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寬孔的電泳條帶更細(xì)，分辨率略有提高。上樣量增加能使條帶亮度增加，原來(lái)該條帶可能量少亮度低所以沒(méi)看到。

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5樓2013-09-13 15:07:31

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會(huì)不會(huì)是PCR操作有區(qū)別，單純的點(diǎn)樣量增多應(yīng)該不會(huì)有太大的差別~~~

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6樓2013-09-13 17:01:31

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7樓2013-09-15 12:42:47

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換換緩沖液，緩沖液污染了也會(huì)有條帶的

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朝著自己的理想奔跑，就是幸福！

8樓2013-09-15 15:19:00

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