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qsx04152006

木蟲 (知名作家)

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[求助] T載體上的目標(biāo)片段與表達(dá)載體連接不上

T載體上的目標(biāo)片段與表達(dá)載體連續(xù)兩次連接不上，請(qǐng)問大概有哪些原因，雙酶切時(shí)，T載體上的目標(biāo)條帶很弱，紫外燈下可見，是不是回收后，基本上沒有目標(biāo)條帶，所以連接不上。另外，我的雙酶切體系，是50微升，內(nèi)切酶各2微升，載體各10微升；連接體系為，20微升，2Xligase buffer:2微升，T4：2微升，目標(biāo)條帶：14.5微升，表達(dá)載體：1.5微升.

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1樓 2013-10-17 20:09:54

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游俠892

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【答案】應(yīng)助回帖

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qsx04152006: 金幣+1, ★有幫助 2013-10-18 12:06:04

l連接體系中2Xligase buffer:2微升？2X不得10微升嗎？

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回復(fù)此樓

路漫漫其修遠(yuǎn)兮，吾將上下而求索

2樓2013-10-18 11:09:58