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專(zhuān)家顧問(wèn)

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[求助] 同一程序和體系pcr有時(shí)會(huì)擴(kuò)增出目的片段有時(shí)沒(méi)有,原因是什么

片段為3000左右，也用了La酶啊，就是p不出來(lái)

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1樓 2013-10-30 14:22:31

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zhouxiaofei

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操作問(wèn)題？還是你的模版濃度不太穩(wěn)定？

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5樓2013-10-31 09:23:35

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wanghx_2012

實(shí)習(xí)版主

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kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2013-10-30 15:37:21

你是加的DNA模板還是進(jìn)行的菌落PCR？
建議額外添加Mg離子2.5-3微，你再試試看。

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2樓2013-10-30 15:00:02

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710002191

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gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2013-10-30 22:46:47

說(shuō)明你的PCR體系還不是很穩(wěn)定，可以適當(dāng)?shù)膬?yōu)化一下，要不就是加樣的問(wèn)題，加樣的時(shí)候要是加的少的東西一定要看吸沒(méi)吸出來(lái)加沒(méi)加進(jìn)去

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may

3樓2013-10-30 15:46:12

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deguohan

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gyesang: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流！ 2013-10-30 22:46:56

試驗(yàn)中的PCR體系不穩(wěn)定，可適當(dāng)?shù)膬?yōu)化，也可巢式一下試試

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天道酬勤，厚德載物

4樓2013-10-30 16:40:39

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