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[求助] DNA試劑盒提取完DNA后的問(wèn)題

http://www.beyotime.com/d0063.htm 這個(gè)是碧云天的試劑盒它的最后一步實(shí)在讓我郁悶
                  將DNA純化柱置于一潔凈的1.5ml離心管上，加入50-200微升洗脫液。室溫放置1-3分鐘�！�12000rpm離心1分鐘。所得液體即為純化得到的總DNA。

他竟然加這么多洗脫液  我們跑電泳的時(shí)候才用20微升跪求這步怎么處理
怎么將200微升變成我要的20微升  求高人指點(diǎn)。

總不能說(shuō)直接從那個(gè)200微升中吸取20微升吧那這個(gè)跑電泳的瓊脂糖凝膠上肯定不會(huì)有DNA條帶的。

[ Last edited by 7782663 on 2013-11-12 at 11:43 ]

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1樓 2013-11-12 11:39:08

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按試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作，一般沒(méi)有問(wèn)題，用50-200ul洗脫的話，根據(jù)你的預(yù)估核酸量加洗脫液，核酸少的話可以用50ul洗脫，再少的話可以預(yù)加熱洗脫液，還可以50ul洗脫后，再用這洗脫液重復(fù)洗脫一次，上樣量也不一定要20ul,要看核酸量，你可以定一下量后再上樣

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12樓2013-11-13 13:15:26

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不一定呀，這是提取DNA的標(biāo)準(zhǔn)步驟，我們平時(shí)就用一點(diǎn)也照常按照那個(gè)做的呀，要是樣本含量本身可以的話提取的DNA濃度是可以滿(mǎn)足要求的，我們實(shí)驗(yàn)用兩微升也是按那個(gè)做的

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may

2樓2013-11-12 13:27:20

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銀杏酸酸

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是的啊，用它給的標(biāo)準(zhǔn)洗脫液體積洗脫，用的時(shí)候取一些，可多次利用。

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3樓2013-11-12 14:51:35

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梧桐柒夕

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那個(gè)不會(huì)有影響的，我跑1%瓊脂糖電泳時(shí)，只取2ul的，我的洗脫液有時(shí)是100ul的，就是條帶清晰程度問(wèn)題，注明的50-200，所以，你完全可以用50的，就是跑出來(lái)的特別亮。OMEGA的我做的時(shí)候是這樣的。不過(guò)，你上樣量有點(diǎn)小多吧？

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4樓2013-11-12 15:03:12

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4樓: Originally posted by 梧桐柒夕 at 2013-11-12 15:03:12
那個(gè)不會(huì)有影響的，我跑1%瓊脂糖電泳時(shí)，只取2ul的，我的洗脫液有時(shí)是100ul的，就是條帶清晰程度問(wèn)題，注明的50-200，所以，你完全可以用50的，就是跑出來(lái)的特別亮。OMEGA的我做的時(shí)候是這樣的。不過(guò)，你上樣量有點(diǎn) ...

我們的梳子有點(diǎn)小呵呵

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5樓2013-11-13 08:37:47

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3樓: Originally posted by 銀杏酸酸 at 2013-11-12 14:51:35
是的啊，用它給的標(biāo)準(zhǔn)洗脫液體積洗脫，用的時(shí)候取一些，可多次利用。

6樓2013-11-13 08:38:01

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肯定的嘛，只要你純化之前的DNA濃度達(dá)標(biāo)，純化后取少量電泳肯定沒(méi)問(wèn)題的，再說(shuō)，假如你真只要20u，那后面你操作失誤浪費(fèi)了一個(gè)那你是不是還得重新來(lái)一次？

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但行好事，莫問(wèn)前程

7樓2013-11-13 08:50:51

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5樓: Originally posted by 7782663 at 2013-11-13 08:37:47
我們的梳子有點(diǎn)小呵呵...

是大吧，你的Marker點(diǎn)樣多少�。縿e說(shuō)也是20微的，那真就是土豪了。

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8樓2013-11-13 10:34:01

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wanghx_2012

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最后洗脫用多少洗脫液那是依據(jù)你的DNA量確定的，多久多加少就少加，不是說(shuō)他讓你加多少就多少。

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9樓2013-11-13 10:35:00

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少了50 μl就覆蓋不了離心管底，洗脫效果也不好。

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10樓2013-11-13 11:23:56

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