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ptccc銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
3‘race的怪異現(xiàn)象
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| 最近做了一個(gè)月的3’race，跌跌撞撞，一直栽在同一個(gè)問(wèn)題上。第一次用GSP擴(kuò)增出大概有200bp的條帶，連接T載體后轉(zhuǎn)化測(cè)序，只得到大概130bp的片段，后面有22個(gè)A，A后面接著3‘接頭；A前面的堿基序列都是對(duì)的，也就是CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA，無(wú)終止密碼，而且CDS也應(yīng)該還差十幾個(gè)堿基。我重新設(shè)了引物再一次做，怪異的現(xiàn)象出來(lái)了，出來(lái)的后面序列也是一模一樣，就是一到CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAA就直接出現(xiàn)POLY a了。GAA后面的幾個(gè)氨基酸死活出不來(lái)，那POLY A是怎么出來(lái)的呀�。。。�！兩次都有做過(guò)巢式，測(cè)序到GAA也是沒(méi)有后面的幾個(gè)堿基。這是為什么呀~~~求助~~~研一的孩子對(duì)實(shí)驗(yàn)都沒(méi)熱情了。。。。 |
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 RACE |
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- 3’RACE擴(kuò)增技術(shù)
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 3'RACE做了幾次，為什么老是這樣子，大家看一下幫幫忙吧，苦悶死了！~
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- 如果目的條帶跟非特異擴(kuò)增的條帶太近能回收嗎
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- 【求助/交流】求助一個(gè)很奇怪的PCR現(xiàn)象
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rodickholm
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2樓2013-11-29 16:21:50
不葉玨
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3樓2013-11-29 19:35:09
ptccc
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4樓2013-11-29 20:27:05
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5樓2013-11-29 20:29:57
夜舞龍
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6樓2013-11-29 21:13:34
楊惠源
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題主，看到你多年前的帖子，，，我現(xiàn)在也出現(xiàn)了相同的問(wèn)題，不知道當(dāng)時(shí)你是怎么解決的阿，求賜教阿，不勝感激。自己快愁哭了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
7樓2018-01-17 02:13:28
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