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ptccc銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
3‘race的怪異現(xiàn)象
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| 最近做了一個月的3’race，跌跌撞撞，一直栽在同一個問題上。第一次用GSP擴增出大概有200bp的條帶，連接T載體后轉(zhuǎn)化測序，只得到大概130bp的片段，后面有22個A，A后面接著3‘接頭；A前面的堿基序列都是對的，也就是CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA，無終止密碼，而且CDS也應(yīng)該還差十幾個堿基。我重新設(shè)了引物再一次做，怪異的現(xiàn)象出來了，出來的后面序列也是一模一樣，就是一到CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAA就直接出現(xiàn)POLY a了。GAA后面的幾個氨基酸死活出不來，那POLY A是怎么出來的呀�。。。�！兩次都有做過巢式，測序到GAA也是沒有后面的幾個堿基。這是為什么呀~~~求助~~~研一的孩子對實驗都沒熱情了。。。。 |
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 RACE |
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- 【求助/交流】求助一個很奇怪的PCR現(xiàn)象
已經(jīng)有23人回復(fù)
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銅蟲 (初入文壇)
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5樓2013-11-29 20:29:57
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4樓2013-11-29 20:27:05
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