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ptccc銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
3‘race的怪異現(xiàn)象
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| 最近做了一個月的3’race,跌跌撞撞,一直栽在同一個問題上。第一次用GSP擴增出大概有200bp的條帶,連接T載體后轉(zhuǎn)化測序,只得到大概130bp的片段,后面有22個A,A后面接著3‘接頭;A前面的堿基序列都是對的,也就是CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA,無終止密碼,而且CDS也應(yīng)該還差十幾個堿基。我重新設(shè)了引物再一次做,怪異的現(xiàn)象出來了,出來的后面序列也是一模一樣,就是一到CAAGGGCTGCCTTAGCTGTCAAGAA就直接出現(xiàn)POLY a了。GAA后面的幾個氨基酸死活出不來,那POLY A是怎么出來的呀。。。!兩次都有做過巢式,測序到GAA也是沒有后面的幾個堿基。這是為什么呀~~~求助~~~研一的孩子對實驗都沒熱情了。。。。 |
RACE |
鐵桿木蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
銅蟲 (初入文壇)
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