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海之韻-哈哈銀蟲(chóng) (小有名氣)
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誘導(dǎo)蛋白表達(dá) SDS-PAGE沒(méi)有目的條帶 已有1人參與
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| 我最近在做基因的原核表達(dá)，做的是一種內(nèi)切木聚糖酶，表達(dá)載體為pET28a，宿主細(xì)胞為BL21。將菌液搖至OD=0.5-0.7時(shí)加0.2mM IPTG誘導(dǎo) 20度 180rpm培養(yǎng)12h、16h、20h、24h。菌體超聲波破碎，破碎后離心有很多白色沉淀，上清可以測(cè)出酶活。將上清液和沉淀進(jìn)行SDS-PAGE電泳，上清中沒(méi)有目的條帶，沉淀中有目的條帶。沉淀中有目的條帶應(yīng)該是包涵體，但是為什么上清中可以測(cè)到酶活卻沒(méi)有目的條帶啊？急求各路高手指點(diǎn)�。�！ |
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