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做完酶切，之后進行連接，轉(zhuǎn)化，可是過夜之后平板上不長菌落，陰性對照也不長菌落 已有3人參與
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我的酶切體系是 PLL3.7質(zhì)粒（293.8ng/ul） 3ul XhoI 0.5ul HpaI 0.5ul buffer 1ul H2O 5ul 混合 37℃水浴 3h 進行0.7 %瓊脂糖凝膠電泳 ，切膠回收 連接 連接體系 T4連接酶 1ul 對照 載體 2ul 干擾片段（1uM） 5ul H2O 3ul 載體（6.9ng/ui） 2ul buffer 1ul H2O 1ul 混合 16℃ 過夜連接 次日轉(zhuǎn)化 結(jié)果 對照版上和實驗板上均無菌落出現(xiàn) 這樣的結(jié)果以出現(xiàn)好長時間 求高人指教 |
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