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菜菜0929木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助轉(zhuǎn)錄組測(cè)序完成后，后續(xù)熒光定量、基因克隆引物設(shè)計(jì)問題 已有1人參與
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我們課題組最近做了轉(zhuǎn)錄組測(cè)序，然后找到差異基因，這些基因都給出拼接出來的序列，我要克隆某些基因。 1、我是需要3‘、5’、再全長(zhǎng)這樣的順序來克隆還是直接設(shè)計(jì)一個(gè)全長(zhǎng)引物直接克隆出來？ 2、我要怎樣利用這樣一條拼接出來的大概1000Kb的序列進(jìn)行PCR引物設(shè)計(jì)和熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)呢？是要直接拿這條已給出的拼接出來的序列在primer5上直接設(shè)計(jì)呢？還是要先去NCBI上比對(duì)出相似序列，再比較著用DNAman什么的設(shè)計(jì)？ 求高人指點(diǎn) |
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菜菜0929
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5樓2014-01-03 19:01:00
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