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菜菜0929木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
急!!這種基因克隆需不需要用RACE
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| 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序后篩選出差異基因,克隆這樣的基因需要用RACE技術(shù)嗎? |

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (小有名氣)

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (小有名氣)

木蟲(chóng) (小有名氣)
送紅花一朵 |
我剛才看了一下,你能不能幫我判斷一下我這樣的流程正不正確? 第一步,把轉(zhuǎn)錄組測(cè)序得到的其中一個(gè)差異基因序列輸入OFR finder,的到了一個(gè)長(zhǎng)的OFR 2.把得到的這個(gè)OFR的氨基酸序列放到NCBI Conserved domains檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)它屬于一個(gè)蛋白家族,這說(shuō)明我得到的OFR是正確的 第三步,利用這個(gè)OFR設(shè)計(jì)引物 第四步,從cDNA里用這個(gè)引物擴(kuò)出全長(zhǎng) 我這個(gè)流程是正確的嗎?還有就是我第一步用來(lái)尋找OFR的序列是直接用我測(cè)序得到的序列還是用把測(cè)序序列比對(duì)到NCBI上得到的同源序列?(我之所以有這個(gè)疑問(wèn)是因?yàn)槔蠋熣f(shuō)考慮到測(cè)序得到的序列是contig、unigene拼接出來(lái)的,可能不完全準(zhǔn)確) 請(qǐng)幫我回答一下,萬(wàn)分感謝 |

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
木蟲(chóng) (小有名氣)

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