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[求助]
求雙酶切連接、載體構建等信息~ 已有2人參與
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| 最近學習雙酶切,但太泛了,完全沒有頭緒,如何在引物兩端加酶切位點也一頭霧水,如何選擇載體?如何構建載體??等等 |
實驗求助 |
送紅花一朵
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鐵桿木蟲 (正式寫手)

金蟲 (著名寫手)
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你可以看看pET原核表達手冊,里面講了很多理論知識,雖然主要是原核表達載體方面的構建,但也可以滿足你的需求。 另外不知道你做雙酶切構建載體是用于哪一方面,所以是不能具體地和你講怎么做到。不管怎樣,選擇酶切位點或者載體構建,都是和你的實驗目的以及序列相關。酶切位點不能是目的序列里面有的,做上下游加入酶切位點的方向要與載體的方向一致。 很多酶的廠家,例如takara/neb/fermentas等網(wǎng)站上都有相關的技術手冊,可以參考。 |

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