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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 色譜質譜 » HPLC問題求助高手
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bobcanada至尊木蟲 (文壇精英)
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[求助]
HPLC問題求助高手 已有3人參與
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2000年購買的Bio-Rad 公司的Biologic DuoFlow Chromatography System，一直用于分析蛋白質（凝膠色譜及離子交換色譜）。最近3－4年沒有人使用了，一直閑置�，F在想用于反相HPLC分析，所以新買了C18色譜柱，但還沒有連接上C18色譜柱。準備先試驗一下系統(tǒng)是否還工作。遇到了麻煩。 流動相A: 0.1% TFA/水；流動相B: 0.1% 乙腈。使用前，2個流動相溶液都分別用超聲波清洗器做15分鐘脫氣處理。 開始試驗系統(tǒng)。流動相：A 90%， B 10%，走3分鐘；然后A從 90%到0%， B從 10%到100%，走25分鐘。 可以看到，沒有連接色譜柱的情況下，色譜圖出現很多峰，特別是在走梯度的時候。如果單純走水，沒有這些峰。 水占90%的時候，峰也很少。好像是每間隔2分鐘，就出1個峰。是氣泡峰嗎？還是以前管線里面沉積的蛋白殘留物？ 本人沒有操作過HPLC，是新手，身邊沒有人請教�，F請教小木蟲上都專家和高手，怎么解決？萬分感謝！ HPLC-BioLogic DuoFlow.PNG |
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乙腈是EMD公司的HPLC專用乙腈。 產品訂購來源： https://ca.vwr.com/store/catalog ... g_number=CAAX0145-1 產品檢驗報告：https://ca.vwr.com/stibo/hi_res/10646475.pdf |
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