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一休陳金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于二倍體釀酒酵母基因敲除的疑問 已有2人參與
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各位蟲友大家新年好。 我最近開始做二倍體釀酒酵母基因的敲除工作，現(xiàn)在遇到兩個(gè)疑問：其一，構(gòu)建一個(gè)（上游同源臂+G418抗性基因+下游同源臂）的敲除盒，一次轉(zhuǎn)化，有沒有可能將兩個(gè)等位基因同時(shí)敲除？這樣的話，我用菌落PCR驗(yàn)證，P不出來目的基因條帶的且?guī)в蠫418抗性的菌落豈不就是敲除的陽性菌落？ 其二，如果第一點(diǎn)不成立，即是一個(gè)敲除盒經(jīng)過一次轉(zhuǎn)化只能敲除一個(gè)等位基因的話，第二個(gè)基因我怎么敲除呢？還望有二倍體釀酒酵母敲除經(jīng)驗(yàn)的蟲友們多多指教！再次祝福大家新年快樂，馬年龍馬精神，百尺竿頭，更進(jìn)一步！謝謝。 |
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7樓2014-02-13 16:33:37
2樓2014-02-12 16:31:17
yuanbo934
至尊木蟲 (著名寫手)
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- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
3樓2014-02-13 15:21:40
一休陳
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4樓2014-02-13 15:23:46
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