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[交流]
real-time PCR 、quantitative RT-PCR 和absolute quantitative real-time PCR的區(qū)別 已有1人參與
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Q-PCR就是定量的PCR，這其中包含real-time PCR real-time PCR指的是用可以實時檢測信號的機器來做PCR，最常用的是roche的light cycler和applied biosystems的機器，一般就是在PCR反應(yīng)中加dye或者probe，每一個cycle都讀一下熒光強度 Q-PCR還可以用其他的方法做，大部分其實都算作semi-quantitative，比如用普通的PCR機器做，保證在PCR的反應(yīng)的線性區(qū)域的時候停止反應(yīng)，這個時候得到的DNA的量應(yīng)該是比較能夠定量的（也經(jīng)常有人添加含反射性元素P32的dCTP到反應(yīng)中，敏感度比一般的PCR高） 至于RT PCR，就是指reverse transcription的PCR，就是從RNA得到cDNA以后進行的PCR，跟real time沒有什么直接關(guān)系 至于absolute，其實就是在做Q-PCR的時候做一個已知濃度的DNA/RNA/cDNA的standard curve，然后根據(jù)未知濃度的樣品PCR的結(jié)果在這個strandard curve的位置來估計未知樣品的濃度 |
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pyq2011
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2樓2014-03-31 09:19:01
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