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[交流]
real-time PCR 、quantitative RT-PCR 和absolute quantitative real-time PCR的區(qū)別 已有1人參與
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Q-PCR就是定量的PCR,這其中包含real-time PCR real-time PCR指的是用可以實時檢測信號的機器來做PCR,最常用的是roche的light cycler和applied biosystems的機器,一般就是在PCR反應中加dye或者probe,每一個cycle都讀一下熒光強度 Q-PCR還可以用其他的方法做,大部分其實都算作semi-quantitative,比如用普通的PCR機器做,保證在PCR的反應的線性區(qū)域的時候停止反應,這個時候得到的DNA的量應該是比較能夠定量的(也經(jīng)常有人添加含反射性元素P32的dCTP到反應中,敏感度比一般的PCR高) 至于RT PCR,就是指reverse transcription的PCR,就是從RNA得到cDNA以后進行的PCR,跟real time沒有什么直接關系 至于absolute,其實就是在做Q-PCR的時候做一個已知濃度的DNA/RNA/cDNA的standard curve,然后根據(jù)未知濃度的樣品PCR的結果在這個strandard curve的位置來估計未知樣品的濃度 |

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