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jasonyuanjx銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
western blot實(shí)驗(yàn)相關(guān)求助 已有1人參與
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本人跨方向做科研，屬于新手一枚，現(xiàn)在在學(xué)習(xí)WB實(shí)驗(yàn)技術(shù)，請(qǐng)教蟲友幾個(gè)問題，希望細(xì)心解答，好答案加金幣： 1，SDS-PAGE分離膠濃度的選擇：在實(shí)驗(yàn)室隨便找了幾個(gè)抗體，想先摸遍WB流程，熟悉方法技術(shù)，所以抗體隨意選擇（目前實(shí)驗(yàn)室有220，80，48，25分子量的蛋白抗體供選擇），內(nèi)參選的是GAPDH，通過(guò)查閱文獻(xiàn)GAPDH分子量是36，我選擇80的目的蛋白可以嗎？如果選48的會(huì)不會(huì)和內(nèi)參太近，影響結(jié)果觀察。如果選80的蛋白，選擇10%的分離膠好，還是12%的分離膠好？ 2，分離膠濃度確定后，用多大的電壓，跑多場(chǎng)時(shí)間為宜？ 3，轉(zhuǎn)膜條件怎么選擇？ |
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2樓2014-05-05 21:12:43
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