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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 畢赤酵母電擊轉化
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稻草人的學習銀蟲 (小有名氣)
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畢赤酵母電擊轉化 已有10人參與
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轉化了都不成功，只長出一個轉化子，怎么辦？ 感受太制備方法是： 1.挑取單菌落至50mlYPD液體中，培養(yǎng)24小時左右，再轉接至50mlYPD中，使初始OD為0.2-0.3.培養(yǎng)至OD為1.2-1.3 2.冰浴30分鐘，離心，用50ml遇冷的無菌水洗，在用25ml無菌水洗。再后用1m山梨醇20ml懸浮。最后用0.35mll山梨醇懸浮分裝。 電擊：線性化質粒7ul與80ul感受太混勻，轉入0.1cm遇冷電擊杯中，電擊條件1.5kv 電容25 電阻200 只長出一個轉化子 要么就不長 不知道哦怎么繼續(xù)啦，請同學們幫忙 |
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