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wangxueflower木蟲 (小有名氣)
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[交流]
想檢測(cè)一個(gè)大約4kD 的小肽片段，western blot 一直沒有條帶怎么辦 已有6人參與
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最近一直在做一個(gè)4kD小肽片段的western, 試過一般的SDS-Page,也嘗試過tricine-SDS-page, 但是一直檢測(cè)不到條帶， 很是郁悶啊，這個(gè)小肽是一個(gè)前體蛋白經(jīng)過酶切后的產(chǎn)物。我用的抗體也是一般常用的特異性抗體。上樣量是30ug/孔。 是不是上樣量太少的原因啊? 還有是不是因?yàn)檫@個(gè)小肽的產(chǎn)量不高？ 轉(zhuǎn)膜方面， 我用的是100V 冰上轉(zhuǎn)膜一個(gè)半小時(shí)，是不是轉(zhuǎn)過了？ 請(qǐng)蟲友們給點(diǎn)建議吧 |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
youlinglyw: 金幣+2, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，生物科學(xué)有你更精彩！ 2014-07-08 10:45:28
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
youlinglyw: 金幣+2, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，生物科學(xué)有你更精彩！ 2014-07-08 10:45:28
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我們用的電泳儀出現(xiàn)那種問題，一般是插頭接觸不好，需要你重新弄一下，還有就是兩塊板之間的電泳液少了，也會(huì)自動(dòng)斷電報(bào)錯(cuò)。。 |
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wangxueflower5樓2014-06-12 16:32:23
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