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尋香海棠新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關于菌落PCR，請教高手幾個問題！ 已有4人參與
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最開始做的時候用機器里之前師兄師姐設定的程序如下： 95℃ 3min 95℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 25s 72℃ 10min 使用通用引物，兩次都沒成功，后來發(fā)現(xiàn)延伸時間太短，設為1min30s后，7個菌成功了4個，還有3個我按照修改后的方法來做仍然沒有一個成功！這是什么回事呢？ 然后我分析可能是預變性時間太短，沒有將細胞壁裂解，打算設為10min，同時擔心挑入培養(yǎng)基進入體系干擾實驗，打算將液體培養(yǎng)的菌液離心取適量菌體。 請問大神這樣做合不合適？還有什么可以改進的嗎？ |
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jurkat.1640
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4樓2014-07-05 09:52:43
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