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最近用qiagen試劑盒提取了一批總RNA準(zhǔn)備做芯片，讓人郁悶的提取了幾次RNA總是這樣見(jiàn)下圖，左側(cè)是Marker ,前3個(gè)是細(xì)胞總RNA，濃度分別是140多，600多， 150多；后4個(gè)是組織RNA，濃度在300-600之間（濃度單位是ng/ul），OD值在2.0左右;膠的濃度是1%TAE，上樣量1ul 6*loading buffer,5ulRNA，Marker5ul未稀釋。電壓100，150v都用過(guò)，是降解了嗎？還是其他原因？

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1樓 2014-07-21 13:03:30

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2樓2014-07-21 13:09:07

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卻是是降解了。

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3樓2014-07-21 13:13:22

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2樓: Originally posted by yuguiyan at 2014-07-21 13:09:07
降解了

剛提的馬上做的電泳啊，做實(shí)驗(yàn)也有很長(zhǎng)時(shí)間了，操作應(yīng)該沒(méi)什么問(wèn)題，難道是試劑？

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4樓2014-07-21 13:22:31

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3樓: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-07-21 13:13:22
卻是是降解了。

槍頭都是高溫滅菌的，操作應(yīng)該沒(méi)什么問(wèn)題的，難道是試劑有問(wèn)題?

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5樓2014-07-21 13:24:45

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4樓: Originally posted by cmugaoxiaohu at 2014-07-21 13:22:31
剛提的馬上做的電泳啊，做實(shí)驗(yàn)也有很長(zhǎng)時(shí)間了，操作應(yīng)該沒(méi)什么問(wèn)題，難道是試劑？...

所有物品都是提RNA級(jí)別的嗎？操作時(shí)間長(zhǎng)了吧，天氣熱你的冰盒涼嗎

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6樓2014-07-21 13:32:03

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yichunh

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試劑是有換新的還是都是之前用著好用的？跑了多長(zhǎng)時(shí)間的電泳？電泳時(shí)間要短一些啊~

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7樓2014-07-21 15:03:39

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親，那確實(shí)是降解了！你確定是用滅菌的？在高壓滅菌鍋滅的是不行的！買(mǎi)提取RNA專(zhuān)用的！還有整個(gè)提取過(guò)程都需要在冰上操作！

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人的一切都應(yīng)該是美麗的！

8樓2014-07-21 17:52:02

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biot

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試劑的問(wèn)題最大，操作只要保證物品是滅菌的就行，也不需要低溫

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9樓2014-07-21 19:58:05

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現(xiàn)在室內(nèi)溫度有些高，如果操作是在冰盒上進(jìn)行的，而且操作沒(méi)問(wèn)題，跑膠時(shí)間不是太長(zhǎng)的話(huà)，應(yīng)該就是試劑盒的問(wèn)題或者是降解了了。

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10樓2014-07-21 20:33:25

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