 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (569)
- >導(dǎo)師招生 (47)
- >考研 (39)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (23)
- >考博 (18)
- >無(wú)機(jī)/物化 (10)
- >文獻(xiàn)求助 (8)
- >公派出國(guó) (4)
- >綠色求助(高懸賞) (3)
- >教師之家 (3)
- >碩博家園 (3)
- >休閑灌水 (3)
- >論文道賀祈福 (2)
- >基金申請(qǐng) (2)
- >論文投稿 (2)
- >育兒交流 (1)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3242 | 回復(fù): 53 | ||
sophia-yxh銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
|
[求助]
WB和elisa結(jié)果不一致 已有3人參與
|
|
目前本人一直在做IFN的融合蛋白，是通過(guò)酵母分泌表達(dá)所得；以前是用大腸桿菌包涵體表達(dá)的，通過(guò)復(fù)性獲得樣品，該樣品通過(guò)ELISA\WB檢測(cè)，以IFN抗體檢測(cè)的，均為陽(yáng)性結(jié)果，且做抗病毒實(shí)驗(yàn)，其抗病毒活性也和市場(chǎng)銷(xiāo)售的IFN在同一個(gè)數(shù)量級(jí)，但是不能達(dá)到我們的目標(biāo)要求，所以選擇真核酵母分泌表達(dá)，想獲得IFN和另一個(gè)蛋白A的雙重作用； 酵母表達(dá)的IFN融合蛋白通過(guò)ELISA檢測(cè)是為陽(yáng)性的，也是用IFN抗體的，我們是自己包板的；但是WB檢測(cè)卻總是陰性的，我們同時(shí)以以前原核表達(dá)的作為對(duì)照，對(duì)照每次WB的結(jié)果都很穩(wěn)定是陽(yáng)性的，但是酵母分泌表達(dá)的卻很難做出陽(yáng)性的，雖然也做出來(lái)1-2次，我現(xiàn)在由以下幾點(diǎn)擔(dān)心： 1.IFN從融合蛋白上脫落了； 2. IFN上有一個(gè)糖基化位點(diǎn)，是不是在真核中糖基化了，恰好遮住了抗體識(shí)別位點(diǎn)； 3.我是通過(guò)DAB顯色的，是不是顯色方式不正確； 請(qǐng)大家?guī)臀矣懻撚懻摚x謝 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
環(huán)境領(lǐng)域全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收博士1-2名
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料專碩306英一數(shù)二
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
302求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
26博士申請(qǐng)
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
268求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
被我言中：新模板不強(qiáng)調(diào)格式了，假專家開(kāi)始管格式了
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 測(cè)得序列基因已導(dǎo)入大腸桿菌，為什么誘導(dǎo)后產(chǎn)生的蛋白與所求蛋白不一致？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- WB上樣時(shí)，樣品稀釋問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助關(guān)于WB的內(nèi)參問(wèn)題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 連續(xù)做了兩邊ELISA，為什么會(huì)不顯色呢？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- WB上樣量不同導(dǎo)致結(jié)果不同，哪一次的結(jié)果可信呢？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 半定量 內(nèi)參條帶不一致
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 這樣的數(shù)據(jù)怎么比較差異呢
已經(jīng)有7人回復(fù)
- WB結(jié)果雜不出目的條帶，只有特別亮的非特異性條帶，求高手解釋原因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 急！待畢業(yè)！使用ELISA檢測(cè)血清中抗體滴度，包被時(shí)的抗原可以不與載體蛋白偶聯(lián)嗎？
已經(jīng)有14人回復(fù)
- WB條帶總是不太整齊
已經(jīng)有6人回復(fù)
- WB的蛋白總量，變還是不變�。�
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 本人想做GUS基因的定量表達(dá)，有熒光法和ELISA好像比較合適，但是不知選哪一種好？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 雙抗體夾心ELISA，陽(yáng)性孔，樣品孔和陰性對(duì)照全部不顯色，怎么回事
已經(jīng)有12人回復(fù)
- WB上樣時(shí)樣品往上漂溢出孔外，電泳后考馬斯亮藍(lán)染色條帶特別淺幾乎看不到。
已經(jīng)有4人回復(fù)
- mRNA水平和蛋白水平不一致如何解釋
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 酶標(biāo)儀測(cè)BSA濃度的方法，不用ELISA法，能經(jīng)過(guò)280nm測(cè)量嗎？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 兩次QPCR前后目的基因的CT值不一樣
已經(jīng)有6人回復(fù)
- WB結(jié)果不理想，呼喚幫助
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】wb時(shí)β-actin加完發(fā)光液不發(fā)光？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】WB中，核蛋白內(nèi)參和總蛋白內(nèi)參的問(wèn)題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】WB老做不出來(lái)
已經(jīng)有6人回復(fù)
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
|
祝福 [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
2樓2014-08-08 13:06:40
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
 |
3樓2014-08-08 13:08:47
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
|
|
4樓2014-08-08 13:17:04
foxs2 
木蟲(chóng) (文壇精英)
- 應(yīng)助: 25 (小學(xué)生)
- 金幣: 1021.6
- 散金: 4128
- 紅花: 7
- 帖子: 26584
- 在線: 406.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1661572
- 注冊(cè): 2012-03-03
- 性別: GG
- 專業(yè): 無(wú)機(jī)非金屬類光電信息與功
5樓2014-08-08 13:22:39
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
|
|
6樓2014-08-08 13:25:42
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
| 祝福 |
7樓2014-08-08 13:31:05
邴紹所
至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
- 應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
- 金幣: 11990.6
- 散金: 1405
- 紅花: 38
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 12887
- 在線: 891.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1912183
- 注冊(cè): 2012-07-26
- 專業(yè): 功能與智能高分子
8樓2014-08-08 13:33:14
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
|
|
9樓2014-08-08 13:34:08
★
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
sophia-yxh(金幣+1): 謝謝參與
|
祝福 |
10樓2014-08-08 13:39:26
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 sophia-yxh 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 環(huán)境領(lǐng)域全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收博士1-2名 +3 | QGZDSYS 2026-03-13 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
[考研] 274求調(diào)劑0856材料化工 +13 | z2839474511 2026-03-11 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +4 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國(guó)防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求老師收留調(diào)劑 +4 | jiang姜66 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +4 | 奇點(diǎn)0314 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料080500調(diào)劑求收留 +3 | 一顆meteor 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料371求調(diào)劑 +9 | 鱷魚(yú)? 2026-03-11 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科院，化學(xué)方向，295求調(diào)劑 +4 | 一氧二氮 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +5 | 隔壁陳先生 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【考研調(diào)劑求收留】 +3 | Ceciilia 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問(wèn)題
 5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|