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一旺百旺新蟲 (著名寫手)
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[求助]
測序的時候測序要求的選項怎么選？ 已有6人參與
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測序要求有六個選項： 正向 反向 雙向 單向 單向測通 雙向測通 這六個選項都有什么區(qū)別呀，，，完全不懂，求教。。。。越詳細越好。。。完全的菜鳥一個 |
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ssssllllnnnn 
至尊木蟲 (知名作家)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-08-13 22:50:06
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-08-13 22:50:06
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如果你自己提供測序引物，就不存在這個問題了（測序引物決定了方向）。如果用公司的引物，則會有這個問題。就一般測序而言，測一個方向就夠了。 如果你要測定目標片段不是很大（如500bp左右），不管是正向還是反向都可以全部讀出了。所以選正向和反向沒有本質(zhì)區(qū)別。 如果你的目標DNA較大，而且需要全部測出序列，這時則可能需要正反方向同時測，以便把整個順序都讀出。 如果你做的是點突變或其他突變體，而突變位置又距離上下游插入點較遠，則可以在突變位置附近合成一測序引物，便于測序。 |
4樓2014-08-11 21:13:56
★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+1, 鼓勵交流！ 2014-08-11 20:15:05
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
gyesang: 金幣+1, 鼓勵交流！ 2014-08-11 20:15:05
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2014-08-11 17:59:21
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣-1, 屏蔽內(nèi)容, 亂碼 2014-08-13 22:49:38
西門吹雪170: 金幣-1, 屏蔽內(nèi)容, 亂碼 2014-08-13 22:49:38
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3樓2014-08-11 20:13:01
★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-08-13 22:50:44
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-08-13 22:50:44
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樓主你好，我剛畢業(yè)，在測序公司做技術(shù)服務(wù)的。你首先要根據(jù)你的樣品類型，如果你是PCR片段的話，一般是自己提供引物的，如果片段大小在800以內(nèi)，如果沒有特殊結(jié)構(gòu)，正向反向都是可以測通的。 如果你是菌液或質(zhì)粒的話，公司一般會有載體上的通用引物的，也是根據(jù)你的片段大小來的，你的插入片段比較小的話只要一個方向就基本能測通，如果在800-1500基本是2個方向也可以測通的，如果您的片段更大的話，你要求雙向測通，這時候公司會在測過兩個反應(yīng)后給你設(shè)計引物繼續(xù)測通的，設(shè)計的引物是要收合成費的。 |
5樓2014-08-11 22:12:15
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