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zans2009銅蟲 (初入文壇)
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用鑒定真菌的通用引物its1、its4，為何擴出目的條帶呢 已有3人參與
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剛篩選出4種真菌，用通用引物做pcr，從電泳圖上看，請問我出了哪些問題呢？ 1號出現彌散條帶，2號條帶范圍從400bp到550bp間，3、4號出現了不止一個條帶，而且最大的達到5000bp，我弄錯了什么嗎？沒分離完全？還是PCR出了問題？ 反應溫度如下： 94℃ 3min 94℃ 30s 55℃ 45s 72℃ 1min 35cycle 72℃ 3min 通用引物 ITSl(5’一TCC GTA GGT GAA CCT GCGG-3’) ITS4(5’一TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC一3’) 四種DNA濃度分別為15ng/ul、31ng/ul、 168ng/ul、 27ng/ul、 260/280分別為1.77、1.63、1.82、1.74。 謝謝了 2014-8-26 _副本.jpg |
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