 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 8707 | 回復(fù): 15 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
zans2009銅蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
用鑒定真菌的通用引物its1、its4，為何擴(kuò)出目的條帶呢 已有3人參與
|
||
|
剛篩選出4種真菌，用通用引物做pcr，從電泳圖上看，請(qǐng)問(wèn)我出了哪些問(wèn)題呢？ 1號(hào)出現(xiàn)彌散條帶，2號(hào)條帶范圍從400bp到550bp間，3、4號(hào)出現(xiàn)了不止一個(gè)條帶，而且最大的達(dá)到5000bp，我弄錯(cuò)了什么嗎？沒(méi)分離完全？還是PCR出了問(wèn)題？ 反應(yīng)溫度如下： 94℃ 3min 94℃ 30s 55℃ 45s 72℃ 1min 35cycle 72℃ 3min 通用引物 ITSl(5’一TCC GTA GGT GAA CCT GCGG-3’) ITS4(5’一TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC一3’) 四種DNA濃度分別為15ng/ul、31ng/ul、 168ng/ul、 27ng/ul、 260/280分別為1.77、1.63、1.82、1.74。 謝謝了 2014-8-26 _副本.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有183人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 真菌多樣性研究中引物選擇問(wèn)題~~~
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 真菌ITS鑒定所使用的同用引物叫ITS1-4,還有ITS1f-4
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 同一菌種用細(xì)菌和真菌引物都跑出了條帶，誰(shuí)能給解釋一下？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 關(guān)于真菌18S在NCBI上BLAST問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- ITS1/4序列進(jìn)行blast同源比對(duì)問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 轉(zhuǎn)化后細(xì)菌提質(zhì)粒，PCR條帶很詭異
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 怎樣從土壤中得到總的真菌？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- PCR擴(kuò)增出來(lái)的條帶,與預(yù)計(jì)大小一致,測(cè)序居然什么都不是????
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 真菌ITS鑒定問(wèn)題若干
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 小鼠基因型PCR鑒定被污染，怎么破？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 真菌轉(zhuǎn)化子PCR驗(yàn)證問(wèn)題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 真菌18S，28S，ITS區(qū)段。
已經(jīng)有14人回復(fù)
- T-RFLP技術(shù)中，真菌的PCR問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 急急急！巢式PCR，第二輪產(chǎn)物跑膠點(diǎn)樣孔有亮帶，似有東西跑不出
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 絲狀真菌ITS引物及PCR條件？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- ITS1和ITS4做樣品體系中真菌菌株鑒定，為啥PCR產(chǎn)物竟然是2個(gè)條帶？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 5 RACE inner-PCR電泳結(jié)果無(wú)條帶，是怎么回事？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 用PCR擴(kuò)增后的DNA如何測(cè)序？不能直接用PCR就知道是什么菌種之類的吧？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 我在跑膠時(shí)的DNA片段大小為什么與測(cè)序后的相差很大呢？？？求大俠指導(dǎo)！
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 求助關(guān)于土壤細(xì)菌分離鑒定的知識(shí)，希望朋友幫忙解答
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 土壤真菌PCR-DGGE中真菌ITS區(qū)引物的選擇
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 請(qǐng)問(wèn)大家做PCR-DGGE的時(shí)候 真菌細(xì)菌放線菌 分別用什么引物？ O(∩_∩)O謝謝
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 向NCBI提交序列問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 真菌ITS序列PCR擴(kuò)增 求助
已經(jīng)有9人回復(fù)
- PCR的BUFFER和DNTPS可以在室溫放嗎？能放多久？謝謝
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于ITS引物的選擇
已經(jīng)有5人回復(fù)
huyan0817
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 55 (初中生)
- 金幣: 3604.8
- 紅花: 3
- 帖子: 344
- 在線: 119.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1232425
- 注冊(cè): 2011-03-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zans2009(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-27 19:14:35
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zans2009(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-08-27 19:14:35
|
DNA模板太多了,可以稀釋20-50倍加1ul！另外不知道樓主的目的是什么，只從電泳圖看，1號(hào)2號(hào)P的挺好，不存在彌散條帶，膠回收下就好了，沒(méi)問(wèn)題。3號(hào)4號(hào)條帶多說(shuō)明你的引物出現(xiàn)了非特異性擴(kuò)增，畢竟你用的通用引物這個(gè)很正常，只要有你想要的目的片斷就可以了，膠回收就可以了！ |
3樓2014-08-27 11:03:15
zans2009
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 459
- 帖子: 44
- 在線: 14.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1427526
- 注冊(cè): 2011-10-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
2樓2014-08-27 10:19:16
zans2009
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 459
- 帖子: 44
- 在線: 14.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1427526
- 注冊(cè): 2011-10-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
4樓2014-08-27 11:46:22
huyan0817
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 55 (初中生)
- 金幣: 3604.8
- 紅花: 3
- 帖子: 344
- 在線: 119.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1232425
- 注冊(cè): 2011-03-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
5樓2014-08-27 12:59:38
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +3 | 彼岸t 2026-03-29 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085601材料工程找調(diào)劑 +11 | oatmealR 2026-03-29 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿：西北大學(xué)，英一數(shù)一408-284分求調(diào)劑 +3 | 12.27 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +6 | Amber00 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +5 | Feisty。 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專碩 +8 | Koxui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +4 | 蝶舞輕繞 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703一志愿9，初試成績(jī)：338，四六級(jí)已過(guò)，有科研經(jīng)歷，求調(diào)劑！ +4 | Zuhui0306 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +7 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 一志愿哈工大總分298分，前三科223分 +5 | dongfang59 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +7 | 嗯滴的基本都 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 330一志愿中國(guó)海洋大學(xué) 化學(xué)工程 085602 有讀博意愿 求調(diào)劑 +3 | wywy.. 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | Sanmu-124 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)308分求調(diào)劑 +8 | 你好明天你好 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +5 | Pigcasso 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑。有半年電池和半年高分子實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +10 | 材料學(xué)257求調(diào)劑 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 342求調(diào)劑 +3 | 加油a李zs 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 336材料求調(diào)劑 +7 | 陳瀅瑩 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|