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鬼羽帝魂木蟲 (著名寫手)
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[求助]
大片段連接大載體難以連接的問題 已有4人參與
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最近做實(shí)驗(yàn)，大片段連接大載體。 載體、片段用相同的酶雙酶切后回收，再連接。 （1）載體10000、片段4000，（2）載體12700、片段4334，改變體系做了3次。 第一次（1）長了1個(gè)，（2）長了好多，但是酶切驗(yàn)證都不對(duì) 第二次，第三次都沒長單克隆。 連接時(shí)載體：片段為1:5，最大試過1:10，16度過夜或者8小時(shí)以上。 甚至，我連接酶都加了2ul（10ul的體系） 卡住了我在這，求指導(dǎo)，謝謝。 |
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- 【求助/交流】pMD-18T載體連接出現(xiàn)了問題，請(qǐng)各位高手指點(diǎn)！��！
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鬼羽帝魂
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9樓2014-09-04 10:44:19
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3樓2014-09-04 09:15:06
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4樓2014-09-04 09:52:00
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