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hajierlove銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
2600bp基因擴(kuò)增 已有6人參與
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2600bp基因擴(kuò)增，用green mix,pcr體系，模板，引物各1u，水，9.5，mix12.5.反應(yīng)程序，95度2min，95度30s，55度30s，72度3min，38個(gè)循環(huán)，72度5min。10保持。 大神們幫忙看看有什么問題，有沒有好用一點(diǎn)的酶推薦 |
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11樓2014-10-05 05:16:12
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+2, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-05 12:52:45
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有些問題大家回復(fù)過，我就結(jié)合我的經(jīng)歷提醒一下。首先，模板的濃度，這個(gè)有時(shí)候會(huì)忽略，我一般用50ng/ul的濃度；還有就是果斷換一支酶試試，我之前遇到過酶污染了，一直p不出...都不行的話，可以真的要從引物入手了... 看了你的程序有兩個(gè)疑問：你的預(yù)變性時(shí)間才2min，會(huì)不會(huì)有點(diǎn)短了；循環(huán)次數(shù)是38次，會(huì)不會(huì)加大你的錯(cuò)配概率... |
7樓2014-09-21 11:18:45
8樓2014-09-22 10:19:54
woyaoniqusi
新蟲 (初入文壇)
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9樓2014-09-24 10:45:30
10樓2014-09-24 12:51:44
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