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hajierlove銅蟲 (正式寫手)
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[求助]
2600bp基因擴增 已有6人參與
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2600bp基因擴增，用green mix,pcr體系，模板，引物各1u，水，9.5，mix12.5.反應(yīng)程序，95度2min，95度30s，55度30s，72度3min，38個循環(huán)，72度5min。10保持。 大神們幫忙看看有什么問題，有沒有好用一點的酶推薦 |
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小小c的123
新蟲 (初入文壇)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+2, 贈人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-05 12:52:45
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有些問題大家回復(fù)過，我就結(jié)合我的經(jīng)歷提醒一下。首先，模板的濃度，這個有時候會忽略，我一般用50ng/ul的濃度；還有就是果斷換一支酶試試，我之前遇到過酶污染了，一直p不出...都不行的話，可以真的要從引物入手了... 看了你的程序有兩個疑問：你的預(yù)變性時間才2min，會不會有點短了；循環(huán)次數(shù)是38次，會不會加大你的錯配概率... |
7樓2014-09-21 11:18:45
hajierlove
銅蟲 (正式寫手)
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2樓2014-09-18 22:38:18
gongeleven
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3樓2014-09-18 22:47:39
4樓2014-09-18 23:25:05
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