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guoxingjun2008金蟲 (正式寫手)
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[求助]
DNA如何定量? 已有2人參與
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對分子生物學(xué)了解不多,屬于菜鳥,想咨詢一下怎么樣才能準(zhǔn)確檢測DNA的量,不是定性。 如果是提取的DNA被活性炭吸附了,如何檢測被活性炭吸附到表面的DNA的量呢? 希望各位專家多提指導(dǎo)意見呀,謝謝! |
銅蟲 (小有名氣)
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可以用定磷法 磷的測定方法很多,F(xiàn)iske-Subbarow定磷法是一經(jīng)典的但至今仍被經(jīng)常采用的方法,它具有靈敏、簡便的特點(diǎn)。各種含磷有機(jī)物經(jīng)硫酸或過氯酸水解,使有機(jī)磷消化成為無機(jī)磷。無機(jī)磷在酸性條件下,與鉬酸鹽(常用鉬酸銨或鉬酸鈉)反應(yīng)生成磷鉬酸鹽絡(luò)合物。用還原劑處理,磷鉬酸鹽絡(luò)合物被還原生成鉬藍(lán),在660nm處有最大光吸收峰。在一定濃度范圍內(nèi),顏色的深淺與磷含量成正比關(guān)系。因此可應(yīng)用分光光度法進(jìn)行磷的定量測定核酸是一類含磷化合物,其分子含有一定比例的磷,一般純的RNA及其核苷酸含磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.0%;DNA及其核苷酸含磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.2%,即每100g核酸含有9.0~9.2g磷,也就是核酸量是含磷量的11倍左右,故測得磷的量,即可求得核酸量。這就是定磷法的理論依據(jù),磷的定量測定是測定核酸含量常用手段之一。 |

金蟲 (正式寫手)
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