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guoxingjun2008金蟲 (正式寫手)
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[求助]
DNA如何定量？ 已有2人參與
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對分子生物學(xué)了解不多，屬于菜鳥，想咨詢一下怎么樣才能準(zhǔn)確檢測DNA的量，不是定性。 如果是提取的DNA被活性炭吸附了，如何檢測被活性炭吸附到表面的DNA的量呢？ 希望各位專家多提指導(dǎo)意見呀，謝謝！ |
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guoxingjun2008
金蟲 (正式寫手)
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周華瑞safari
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【答案】應(yīng)助回帖
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可以用定磷法 磷的測定方法很多，F(xiàn)iske-Subbarow定磷法是一經(jīng)典的但至今仍被經(jīng)常采用的方法，它具有靈敏、簡便的特點。各種含磷有機物經(jīng)硫酸或過氯酸水解，使有機磷消化成為無機磷。無機磷在酸性條件下，與鉬酸鹽（常用鉬酸銨或鉬酸鈉）反應(yīng)生成磷鉬酸鹽絡(luò)合物。用還原劑處理，磷鉬酸鹽絡(luò)合物被還原生成鉬藍(lán)，在660nm處有最大光吸收峰。在一定濃度范圍內(nèi)，顏色的深淺與磷含量成正比關(guān)系。因此可應(yīng)用分光光度法進(jìn)行磷的定量測定核酸是一類含磷化合物，其分子含有一定比例的磷，一般純的RNA及其核苷酸含磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.0%；DNA及其核苷酸含磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為9.2%，即每100g核酸含有9.0～9.2g磷，也就是核酸量是含磷量的11倍左右，故測得磷的量，即可求得核酸量。這就是定磷法的理論依據(jù)，磷的定量測定是測定核酸含量常用手段之一。 |
2樓2015-04-09 12:52:58
3樓2015-04-09 16:41:06
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