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[求助]
pcr反應(yīng)cytb序列擴不出原因？求分析！ 已有2人參與
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本人本科生，目前做書虱的種內(nèi)鑒定。之前用引物擴增ITS序列，電泳出現(xiàn)條帶，但是送去公司檢測，說亮帶里有比較亂，無法測序�，F(xiàn)在用引物擴增cytb序列，發(fā)現(xiàn)沒有條帶。 試劑 ddh2o 31.5ul dNTP 4ul buffer(Mg2+) 5ul 引物1 1.5ul 4個ep管分裝 每個ep12.5ul 引物2 1.5ul taq酶 0.5ul 模板 6ul （之前老師也做過幾次，同樣沒有條帶）退火溫度為40.0 41.2 43.9 47.7 52.6 56.5 58.8 60.0“℃。 模板有一年了，但是its 有條帶，很亮，只是無法測序。用新的模板可以擴出很亮的條帶（cytb）。想求助是不是模板的問題. cytb: F TATGTACTACCATGAGGACAAATAT R ATTACACCTCCTAATTATTAGGAAT |
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lomis
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6樓2015-04-10 16:10:53
lomis
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